北京中医药大学基础医学院 陈明 (北京 100029)
　　
关键词：百福生胶囊　肿瘤　癌症　胃癌　细胞凋亡
百福生胶囊系一种天然药物提取而成的生物反应调节剂(Biological Response Modify——BMS)，临床主要功效为益气补虚，扶正增免，提高免疫功能。近年来的研究表明，百福生胶囊具有抗肿瘤作用，体内、体外抑瘤实验表明百福生提取液具有明显的抗肿瘤效应，并能延长荷瘤小鼠的生存期[1]，临床研究显示百福生胶囊能影响虚证患者的T细胞亚群[2]，并能够改善晚期恶性肿瘤患者的生存质量，延长其生存期[3]，为了进一步探讨百福生胶囊抗肿瘤治疗的作用机制，我们应用百福生提取液对人胃癌细胞的凋亡作用进行了实验研究，现报告如下：
1、材料与方法
1.1 实验材料
实验药品：百福生提取液由郑州博生医药技术发展有限公司提供，浓度98.5%,实验前先用生理盐水将百福生提取液稀释制备，使其终浓度稀释成5×10^-3 mol/L、5×10^-4 mol/L、5×10^-5 mol/L 三种不同浓度的百福生提取稀释液,备用。
实验试剂：小牛血清：上海生物制品研究所提供，56℃、30min灭活，-20℃冰箱保存。PRMI1640培养液：美国Gibco公司产。
1.1.2 实验细胞株 人胃癌SGC-7901细胞系引自北京肿瘤研究所。
1.1.3 实验仪器
光学显微镜，重庆光学仪器厂，电子显微镜(JEN-100CX日本电子公司)，96孔培养板(丹麦Nunc公司)，FACS Vantage流式细胞仪(美国BECTON-DICKINSONW公司)。
1.2 实验方法
1.2.1 细胞培养：用含RPMI1640、10%小牛血清、100U/mL青霉素、100mg/ml链霉素的培养液，置37℃、5%CO2及饱和湿度的恒温箱中悬浮培养人胃癌SGC-7901细胞，每2-3天传代一次。在传代24h的细胞悬液中加入三种不同浓度的百福生提取稀释液（5×10—3 mol/L、5×10—4 mol/L、5×10—5 mol/L ），分别于加药后24h、48h、72h内收集细胞备测，以观察细胞凋亡情况。并设对照组。
1.2.2 光学显微镜观察 用倒置显微镜观察细胞凋亡改变，收集细胞用离心涂片机涂片，10%中性福尔马林固定，常规HE染色。
1.2.3 流式细胞仪：对照组与实验组细胞分别用2%胰酶-EDTA消化，1000r/min离心10min收集，用0.01mol/L pH7.4 PBS洗3次，4℃、70%乙醇固定，上机前加50μg/ml碘化丙锭(PI) 4℃染色1h，调整细胞浓度为105/ml，激发波长472nm，细胞数15000个，用流式细胞仪进行细胞周期分析，低于G1期DNA含量的细胞为凋亡细胞。
1.2.4 凋亡指数(AI)：凋亡指数是随机计数100个细胞中凋亡形态细胞所占百分数。每张涂片在400倍高倍视野下，每视野计数100个细胞，随机选择5个视野(×40)，计数500个细胞，计算每个视野凋亡细胞所占百分数，求均值。
2 结果
2.1 百福生提取液对人胃癌SGC-7901细胞生长增殖的抑制作用
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